Fluorokrom

Fluorokromer er molekyler som sender ut lys, det vil si at de fluorescerer, når man lyser på dem med UV-lys.(1) Fluorokromene er subtstanser med høy sensitivitet som brukes til merking av biomolekyler. En rekke cellulære bestandeler og funksjoner kan studeres kvalitativt og kvantitativt ved å binde fluorescerende fargestoff til fluorokromer der cellulære parametre ønskes å studere.(2)

Fluorokromerne har en del aromatiske ringer, som har dobbeltbindinger mellom C-atomene. Disse bindingene kalles konjugerte bindinger. De konjugerte bindingene inneholder elektroner som absorberer lys fra et område av lysspekteret og emitterer lys i det synlige område. Lysspekteret behøver ikke å være synlig lys.bølgelendeskiftet fra eksitasjon til emmisjon kalles stokes shift. Jo større stokes shift er, jo lettere er at å skille det fluoriserende lyset fra lys. De fleste fluorokromer har et stokes shift på 20-60 nm. Hvis man forbinder et fluorokrom kjemisk til et DNA vil DNA lyse opp slik at det da kan identifiseres. (3)

Når fluorokromet blir bestrålt ved fluorescens har den tre faser. Ved første fase blir fluorokromets energi absorbert slik at den går fra hvilefase til den eksiterte fasen(eksitasjon). Ved andre fase vil noe av den høye energien gå tapt på grunn av vibrasjoner, konformasjonsenringer og spredning av energien og da vil fluorokromen stabiliseres. Ved siste fase vil fluorokromet gå tilbake til hvilefase. (4)

Effektivitet på et fluorokrom blir målt i forhold mellom antall fotoner som er absorbert og antall fotoner som er stålt ut. (5)

(1) [] (2) [] (3) [] (4) [] (5) []