ALP+p-nitrofenylfosfat+metode

ALP står for alkalisk fosfatase, og er et hydrolytisk enzym som katalyserer en stor andel av naturlige og syntetiske substrater. 4-nitrofenyl fosfat er det mest anvendte substratet for å bestemme ALP aktiviteten. p-nitrofenyl fosfat er det gamle navnet til substratet. ALP katalyserer hydrolyse av 4-nitrofenyl fosfat ved pH 10,4, og får et fargeomslag fra blank til gul.[1] Dette vist ved denne likningen:

// Figur 1, reaksjon for ALP 4-nitrofenylfosfat [2] // Ved bruk av et spektrofotometer måles enzymets aktivitet ved å se på dannelse av 4-nitrofenol ved en bølgelengde på 405 nm. Mengden 4-nitrofenol målt fotometrisk i prøven vil da være proporsjonal med den katalyserte konsentrasjonen av ALP tilstede i prøven.[3] Til denne analysen brukes heparinplasma eller serum. Serum som nettopp er tatt bør helst stå i romtemperatur, og analyseres innen 4 timer.[4] Preanalytiske faktorer som vil være avgjørende for resultat i analysen: - Kompleksdannere som EDTA, citrat vil binde kationer som Mg2+ og Zn2+ som er viktig for måling av ALP. Dette vil føre til feil resultat. - Prøven bør tines 18-24 timer før analysering. Dette for å unngå feil resultat.[5]
 * Valg av prøveglass
 * Ved frysing

// Tabell 1, Referanseområder[6] //
 * Referanseområde for ALP i serum: || Område (U/l) ||
 * Barn (4-15 år) || 54 - 369 ||
 * Menn (20-50 år) || 53 - 128 ||
 * (>60 år) || 56 – 119 ||
 * Kvinner (20 – 50 år) || 42 – 98 ||
 * (>60 år) || 53 - 141 ||
 * (>60 år) || 53 - 141 ||

//Kilder://

- //Tietz fundamentals of clinical chemistry – Carl A. Burtis, Edward R. Ashwood, David E. Bruns. Sixth edition. Saynders (W.B) Co Ltd 2007. ISBN:// // 9780721638652. //

- []

- []

[1] Tietz s. 326 [2] http://sv.rilpedia.org/wiki/Enzymkopplad_immunadsorberande_analys (25.09.2011 kl. 1221) [3] [] (25.09.2011 kl. 1226) [4] Tietz s. 326 [5] Tietz s. 326 [6] Tietz s. 327, tabell 19-4